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在生物醫(yī)學(xué)研究和臨床診斷中,免疫分析技術(shù)已成為非常重要的工具,用于定量檢測(cè)各種生物標(biāo)志物,如細(xì)胞因子、抗體和蛋白質(zhì)等。然而,免疫分析結(jié)果的準(zhǔn)確性常常受到多種因素的干擾,其中異嗜性抗體(Heterophile Antibodies)的干擾尤為顯著。
什么是異嗜性抗體
人血清/血漿中的異嗜性抗體,可結(jié)合其他種屬的免疫球蛋白,包括作為免疫分析試劑的異源抗體。這些抗體會(huì)干擾免疫檢驗(yàn)體系,造成與實(shí)際分析物濃度無(wú)關(guān)的檢測(cè)值,可能導(dǎo)致誤診。異嗜性抗體具有較弱的親和力且表現(xiàn)出多物種特異性。這類抗體在正常人群中以一定比例存在,尤其是在某些特定條件下,如病毒感染、免疫調(diào)節(jié)治療或接種疫苗后,其產(chǎn)生率可能會(huì)增加。異嗜性抗體在免疫分析中的存在可能導(dǎo)致假陽(yáng)性或假陰性結(jié)果,嚴(yán)重影響分析結(jié)果的準(zhǔn)確性。
異嗜性抗體對(duì)免疫分析的干擾機(jī)制(圖1)
假陽(yáng)性結(jié)果:異嗜性抗體能夠通過(guò)橋接捕獲抗體和檢測(cè)抗體,形成非特異性的免疫復(fù)合物,從而導(dǎo)致目標(biāo)分析物濃度被高估,產(chǎn)生假陽(yáng)性結(jié)果。這種現(xiàn)象在雙位點(diǎn)免疫分析中尤為常見。
假陰性結(jié)果:在某些情況下,異嗜性抗體也可能直接結(jié)合到捕獲抗體上或是檢測(cè)抗體上,占據(jù)其結(jié)合位點(diǎn),從而阻止目標(biāo)分析物與捕獲抗體的有效結(jié)合,導(dǎo)致假陰性結(jié)果。
圖1 異嗜性抗體對(duì)免疫分析的干擾機(jī)制
如何減少異嗜性抗體干擾
1 選擇高特異性的抗體:
抗體篩選:使用經(jīng)過(guò)驗(yàn)證的高特異性抗體,減少與非目標(biāo)抗原的交叉反應(yīng)。
單克隆抗體:選擇單克隆抗體,它們通常具有更高的特異性。
2 加入阻斷劑:
阻斷劑是一種生物制劑,加入免疫檢驗(yàn)體系中,可結(jié)合異嗜性抗體,從而有效防止非分析物介導(dǎo)的抗體橋連。
3 稀釋樣本:
在高濃度的樣本中,異嗜性抗體可能會(huì)與檢測(cè)系統(tǒng)中其他成分發(fā)生非特異性結(jié)合,導(dǎo)致背景信號(hào)的增加。稀釋樣本可以降低這些非特異性結(jié)合的可能性,從而提高信號(hào)的特異性。
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